PCR不同區域可合并情況(一)
場景:使用實時熒光PCR儀
依據:關于印發《機構臨床基因擴增管理辦法》的通知;機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛辦醫政發〔2010〕194號
合并:擴增區、擴增產物分析區可合并

PCR不同區域可合并情況(二)
場景:采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀
依據:關于印發《機構臨床基因擴增管理辦法》的通知;機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛辦醫政發〔2010〕194號
合并:標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。







①臨床標本中存在的大量待測微生物或待測靶核酸
②科研中得到的質粒
③以前分析研究的特定微生物或靶核酸
④大量存在于實驗環境中的特定微生物或靶核酸
⑤以前擴增產物的殘留污染,這也是 PCR 實驗室產生的將造成假陽性的“污染”。

PCR擴增可以引起實驗室中擴增產物的累積,通常一次典型的PCR
擴增可以產生109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產物。如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化的擴增產物即會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統,從而造成嚴重的實驗室“污染”,出現大量的假陽性結果。
1.進入各工作區域應當按照單一方向進行,即試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區。
2.各區域的設備、清潔用具標記明確,不得混用。

3.各區域的衣服用不同顏色標記,離開各區域時不得將工作服帶出。
4.試驗臺用移動式紫外線燈消毒,高度60-90cm。擴增區延長照射時間,是過夜照射。同時各區域還需安裝懸掛式紫外線燈管。
5.各試驗區盡量避免不必要的走動和進出,減少風險。
6.擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。